水分滴定儀滴定法測定稻米中總淀粉的分析步驟

探討氧化還原滴定法測定大米中總淀粉含量的方法和條件，確定操作步驟、計算公式、允差等，選擇10批樣品進行應(yīng)用性實驗。

1   適用范圍

本方法規(guī)定了滴定法測定稻米中總淀粉的分析步驟。

本方法適用于各類食品中總淀粉含量的測定。

2   規(guī)范性引用文件和參考文獻

FNCPLSDM00019 稻米中總淀粉的測定

GB5009.7—85 食品中還原糖的測定

GB5009.9—85 食品中淀粉的測定

3   原理 

樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖，然后按還原糖測定，并折算成淀粉。 

4   試劑與溶液 

4.1 堿性酒石酸銅甲液：稱取 15g 硫酸銅（CUSO4·5H2O）及 0.05g 次甲基藍，溶于水中并稀釋至 1000mL；

4.2 堿性酒石酸銅乙液：稱取 50g 酒石酸鉀鈉 75g 氫氧化鈉，溶于水中，再加入 4g 亞鐵溶解后，用水稀釋至 1000mL，儲存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)； 

4.3 乙酸鋅溶液：稱取 21.9g 乙酸鋅，加 3mL 冰乙酸，加水溶解并稀釋至 100mL；

4.5 85%乙醇溶液；

4.6 20%乙酸鉛溶液；

4.7 10%硫酸鈉溶液；

4.8 10.6％亞鐵溶液；

4.9 甲基紅指示劑：0.2%甲基紅乙醇溶液； 

4.10 酚酞指示劑： 0.1%酚酞乙醇溶液；

4.11 葡萄糖標準溶液：精密稱取 1.000 克經(jīng)過 98-100℃干燥至恒重的純葡萄糖，加水溶解后加入 5mL 鹽酸，并以水稀釋至 1000mL。此溶液每毫升相當于 1mg 葡萄糖。

4.12 堿性酒石酸銅溶液的標定： 吸取 5.0mL 堿石酸銅甲液及 5.0mL 乙液，置于 150mL 錐形瓶中，加水 10mL，加入玻璃珠 2 粒，從滴定管滴加約 9mL 葡萄糖標準溶液，控制在 2min 內(nèi)加熱至沸，趁沸以每兩秒一滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標準溶液，直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄消耗葡萄糖標準溶液的總體積，同時平行操作 3 份，取其平均值，計算每 10mL （甲、乙液各 5mL）堿性酒石酸銅溶液相當于葡萄糖的質(zhì)量（mg）。

5   儀器設(shè)備

5.1 水浴鍋； 

5.2 電爐；

5.3 高速組織搗碎機：1200轉(zhuǎn)/min ；

5.4 光熱電位滴定儀

5.4 玻璃器皿：回流冷凝器；50 mL 滴定管；150mL、250mL 三角瓶；500mL 容量瓶；5mL 

50mL 移液管；200mL 量筒

6   試樣制備

    取稻米樣品適量，使用高速組織搗碎機將樣品粉碎，過40目篩，置于磨口玻璃瓶中備用。

7   分析步驟

7.1 預(yù)試驗

吸取 5.0mL 堿性酒石酸銅甲液及 5.0mL 乙液，置于 150mL 錐形瓶中，加水 10mL，玻璃珠 2 粒。控制在 2min 內(nèi)加熱至沸，趁沸以先快后慢的速度從滴定管中滴加樣品溶液，并保持溶液沸騰狀態(tài)，待溶液顏色變淺時，以每兩秒一滴的速度繼續(xù)滴定，直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積。

7.2 空白試驗

7.3 樣品測定

稱取 2.00～5.00g 磨碎過 40 目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用 30 mL 分三次洗去樣品中脂肪，棄去。再用 150 mL 85%乙醇溶液分數(shù)次洗滌殘渣，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙醇溶液，以 100mL 水洗滌漏斗中殘渣并轉(zhuǎn)移至 250mL 錐形瓶中，加30mL 6N 鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流 2h。回流完畢后，立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后，加入 2 滴甲基紅指示液，先以 40%氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以 6N 鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深，可用精密 pH 試紙測試，使樣品水解液的 pH約為 7。然后加 20mL 20%乙酸鉛溶液，搖勻，放置 10min。再加 20mL 10%硫酸鈉溶液，以除去過多的鉛，搖勻后將全部溶液及殘渣轉(zhuǎn)入 500mL 容量瓶中，用水洗滌錐形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液 20mL，濾液供測定用。吸取 5.0mL 堿性酒石酸銅甲液及5.0mL 乙液，置于 150mL 錐形瓶中，加水 10mL，玻璃珠 2 粒。從滴定管中滴加比預(yù)測體積少 1mL 的樣品溶液，使在 2 分鐘內(nèi)加熱至沸，趁沸繼續(xù)以每兩秒一滴的速度滴定，直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積，同法平行操作 3 份，得出平均消耗體積，根據(jù)滴定時平均消耗樣品溶液體積，計算樣品中的總淀粉含量。

7.4 工作曲線

8   結(jié)果計算

    稻米中的總淀粉含量按式（1）計算

              ……………（1 

式中：

X：樣品中淀粉含量，%；

m1：10mL堿性酒石酸銅溶液（甲乙液各 5mL）相當于還原糖（以葡萄糖計）的質(zhì)量，mg；

m2：樣品質(zhì)量，g；

V1：樣品液總體積，mL；

V2：滴定時平均消耗樣品溶液體積，mL；

0.9：還原糖折算成淀粉的換算系數(shù)。

9   精密度

待定