酶標(biāo)儀的維修實(shí)例及使用探討

酶標(biāo)儀在實(shí)際應(yīng)用中很廣泛，如應(yīng)用在臨床鑒別乙肝兩對(duì)半，HIV等很多方面。在臨床實(shí)驗(yàn)方面應(yīng)用在鑒定DNA等許多方面，可以說(shuō)它是臨床及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)*的基礎(chǔ)設(shè)備。

故障一：測(cè)量的結(jié)果重現(xiàn)性不好，即使用空板測(cè)量誤差也在允許的范圍之外。

故障分析：檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒(méi)有問(wèn)題，檢查判定公式也沒(méi)有問(wèn)題，檢查光路也沒(méi)有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒(méi)有卡到位，造成微板在測(cè)量時(shí)在機(jī)內(nèi)晃動(dòng)影響測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)。

故障二：測(cè)量結(jié)果OD值偏低。

故障分析：排除完燈的能量值偏低后，檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵，用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾干后故障排除。

測(cè)試方法：酶標(biāo)儀的儀器指標(biāo)在最佳狀態(tài)，就儀器的精度測(cè)試和儀器的線性度介紹幾種測(cè)試方法：

精度測(cè)試：該過(guò)程可被用于檢測(cè)不同微板之間的測(cè)量精度。使用新制備的在0．1％ TWEEN20中的橘黃色甲基填充微孔，在每個(gè)微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個(gè)光密度范圍，首先確保每孔注入200mL液體，使用492nm慮光片測(cè)量至少3次，對(duì)每一微孔進(jìn)行下列計(jì)算：(1)平均OD值；(2)高和值；(3)平均值。高和值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在0．000到2．000Abs。同一孔平均值，高值和低值之間的差值應(yīng)該在+／一1．0％和+／一0．010OD范圍內(nèi)。

讀數(shù)范圍在2．000到3．000Abs同一孔平均值，高和低值之間的差值應(yīng)在+／一1．0％ 和+／一0．005OD值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在3．000Abs以上時(shí)準(zhǔn)確度不符合要求。

儀器線性度：儀器的線性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nIn處測(cè)量在0．1％TWEEN20中的橘黃色甲基的稀釋系列，具體方法如下：在參考光密度計(jì)上測(cè)量被稀釋的溶劑，畫出OD值對(duì)已知濃度的點(diǎn)圖，并畫出通過(guò)這些點(diǎn)的直線。將從系列稀釋中測(cè)得的吸光度值與該圖比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250t,-L，對(duì)每種稀釋至少使用兩個(gè)樣本，以便降低因加樣引起的誤差。

測(cè)量微板使用精確測(cè)量模式，利用測(cè)量得到的平均OD值和每個(gè)樣本的已知濃度畫一條OD濃度的曲線，從系列稀釋中測(cè)得的吸光值與該曲線比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。對(duì)光度記和本儀器，比較計(jì)算的濃度，不準(zhǔn)確度不應(yīng)大于以下，使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片492nm時(shí)吸光度在0．000～2．000Abs+／一1％、2．000～3．000Abs+／一1．5％。使用梯度濾光片492nm時(shí)，吸光度在0．000～2．500Abs+／一2％。